TurboTEV蛋白酶是一种高度增强的半胱氨酸蛋白酶，源自烟草蚀刻病毒（TEV）N1a蛋白的催化片段。它能够特异性地识别并切割Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly序列中的Gln与Gly之间的连接。该酶在4°C下展现出卓越的活性和稳定性，且无需特殊的缓冲液，因此可以在适合目标蛋白的缓冲条件下使用。

TurboTEV蛋白酶的分子量为52 kDa，配备GST和His标签，便于通过Ni螯合或谷胱甘肽（GSH）树脂去除剪切标签。其来源于大肠杆菌，活性超过10单位/µg，能够在30℃的条件下，使3µg对照底物在1小时内被裂解85%。

俄罗斯专享会284提供的TurboTEV蛋白酶操作流程如下：

1. 在冰冷的透析缓冲液中准备目标蛋白样品：
   • A. 将25 mM Tris-HCl (pH 8.0)、150-500 mM NaCl和14 mM β-巯基乙醇的透析缓冲液配制好。
   • B. 将目标蛋白样品稀释至1-2 mg/mL，如有聚集可跳过此步骤。
   • C. 添加TurboTEV蛋白酶，比例为目标蛋白与蛋白酶1:100（w/w），即100 mg目标蛋白对应10000单位（1 mg）TurboTEV蛋白酶。
   • D. 透析样品于4°C下放置过夜（约16小时）。
2. 去除TurboTEV蛋白酶。
3. 进行SDS-PAGE分析（可选）。

产品应用包括：

• 蛋白质裂解功能
• 从重组蛋白中去除融合标签
• 蛋白质和肽的纯化

常见问题解答： 1. TEV消化反应的缓冲条件（25 mM Tris-HCl, pH 8.0, 150 mM NaCl和14 mM β-巯基乙醇）有多重要？是否存在对TurboTEV剪切效率有负面影响的成分？

• (a) 1 mM的DTT可接受；
• (b) 不推荐使用10%甘油；
• (c) 不推荐20 mM组氨酸；
• (d) 不建议使用500 mM NaCl；
• (e) 不推荐100 mM Tris；
• (f) β-巯基乙醇的功能类似于DTT，可加入。

2. 在剪切之前需要缓冲液交换吗？ 答： 这可能是必要的。

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